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Alkaline Phosphatase from E.Coli 堿性磷酸酶,來自大腸桿菌

貨號:X11497
品牌:XYbio
CAS號:9001-78-9
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X11497

Alkaline Phosphatase from  E.Coli  堿性磷酸酶,來自大腸桿菌

10mg

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特性說明:


CAS號

 9001-78-9

純化方式

鹽分餾

外觀

2.5M硫酸銨懸液,PH 8.0

抑制劑

螯合劑和無機磷酸鹽

最佳PH

8.0

比活力

≥10 units/mg protein (25℃,PH8.0)

活性單位定義

25℃,ph8.0反應條件下,每min內水解pNPP生成1μmol對硝基苯酚所需的酶量定義為1個unit

運輸條件

冰袋運輸

儲存條件

2-8°C保存,有效期1年


產品描述:

堿性磷酸酶(Phosphatase, Alkaline, ALP,EC3.13.1) ,是一種含兩個相同亞基的二聚體,也是一種約含12%碳水化合物(6%己糖和6%其他中性糖)的糖蛋白,每個ALP分子含4個鋅離子和4個二硫鍵。鎂離子存在情況下,ALP可達到最高酶活。AP能催化磷酸單酯水解,比如對硝基苯酚磷酸鹽(pNPP) 、 磷酸苯酯、酚酞磷酸、α-甘油磷酸、β-甘油磷酸、2-磷酸甘油酸、磷酸丙糖、葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖-1-磷酸、果糖-6-磷酸、腺苷-5-磷酸、腺苷-3-磷酸、磷酸烯醇式丙酮酸和β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸等。

堿性磷酸酶(ALP)常用來偶聯抗體和其他蛋白,從而滿足ELISA、WB和組織化學檢測上的應用。通常用來蛋白的去磷酸化實驗,比如酪蛋白和核酸等。當需要高檢測靈敏度時也能用來蛋白標記。還可用在DNA或RNA的5,-末端去磷酸以防止自連。經堿性磷酸酶的去磷酸化作用后,DNA或RNA還可被放射性標記磷酸鹽標記(通過T4多核苷酸激酶)。


純化酶產品(硫酸銨懸浮液形式)使用方法

1 當硫酸銨可能會干擾酶反應,操作如下:

1.1從冰箱內取出酶。[注: 硫酸銨懸浮液產品不可凍存! ! ]

1.2確保蓋子擰緊,然后顛倒混勻數次得到乳白色懸浮液,此過程可能需要一分鐘左右。 不可渦旋或超聲,因如此強烈的處理可能會引|起某些酶的變性。

1.3使用寬口槍頭,吸取一部分懸浮液轉移到一干凈的離心管內。


1.4約10,000~15,000x g離心10min.若是條件允許,低溫(2-8℃) 設置下離心。.

1.5小心吸取盡可能透明的上清液,并保留到干凈的離心管內。沒有必要完全吸掉所有的硫酸銨溶液。

1.6用適量的反應緩沖液加入沉淀中并使其溶解。

1.7對上述得到的上清液,以及用反應緩沖液溶解的酶溶液進行蛋白含量和/或酶活力檢測。


2 當硫酸銨不會干擾酶反應,操作如下:

2.1從冰箱內取出酶。[注: 硫酸鈹縣浮液產品不可凍存! ! ]

2.2確保蓋子擰緊,然后顛倒混勻數次得到乳白色懸浮液。此過程可能需要一分鐘左右。 不可渦旋或超聲,因如此強烈的處理可能會引起某些酶的變性。

2.3使用寬口槍頭,吸取一部分層浮液直接加入反應緩中液中即可。

[注意:對于硫酸銨懸浮液,絕大部分的酶都是以固體形式存在。很有可能僅僅可忽略量的酶以溶于硫酸銨溶液的形式存在。]


注意事項:

為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一 次性手套操作。


本產品僅供科研使用,不可用于臨床診斷應用或其他用途。

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