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明膠(Gelatin) CAS號：9000-70-8，是一種由高平均分子量的水溶性蛋白組成的非勻質混合物，存在于膠原蛋白中。通過對皮膚、肌肆、韌帶和骨頭等組織煮沸后提煉所得。A型明膠(Type A Gelatin)來自酸水解的組織，B型明膠(Type B Gelatin)來自石灰水解的組織。

生物學研究，明膠的應用包括: 1)包被細胞培養(yǎng)板以提高細胞的貼壁能力; 2) 加入PCR反應以穩(wěn)定Taq DNA聚合酶活性; 3) WB、ELISA和IHC實驗中用作封閉劑;4)微生物學研究用作物種分化培養(yǎng)基組成成分之一; 5)作為生物兼容性聚合物，明膠能用作運輸載體來釋放生化活性分子，或組織再生學中建立支架。

本品以牛皮為原料，提煉自石灰水解組織所得，為B型明膠。本品以凍干粉形式提供，CAS NO: 9000-70-8， 凝膠強度~225 g Bloom,達細胞培養(yǎng)級別。用于細胞包被基質的推薦工作濃度為0.1-0.2 mg/cm²。

使用方法：

一、 明膠溶液的制備

1.1明膠的溶解

根據實驗所需的明膠濃度,稱取適量明膠粉末，加入含雙蒸水或PBS緩沖液的容器內，按照以下兩種方法之一: 1)明膠經10 min浸泡后，用熱水浴加熱(溫度不要超過70°C)，攪拌直至完全溶解; 2)明膠經10 min浸泡后用小火加熱(溫度不要超過70°C)，并不斷攪拌直至完全溶解;

1.2明膠的除菌

按照以下兩種方法之一:

1)高壓滅菌:將配好的明膠溶液(常用濃度0.1%~2.0%之間) 裝入瓶內，121℃. 15 psi,高壓滅菌20min;

2)濾膜除菌:低濃度明膠溶液(如0.1%或0.2%)溶解后可用0.2μm濾膜除菌。但需多準備幾個濾器，因為明膠相對比較難過濾。

1.3明膠的保存

明膠溶液穩(wěn)定性比較高，置于4°C保存能長期保持穩(wěn)定。[注意] :溫度提高會明顯降低明膠強度和粘度，導致性能降低。

二、明膠溶液的包被方法

具體的使用濃度和使用量依據細胞類型和實驗目的而定。

2.1用組織培養(yǎng)級別的水配制2% (w/v) 的明膠溶液;

2.2 121°C，15 psi,高壓滅菌20-30 min;

2.3按照5-10 μL明膠溶液/cm² (或0.1-0.2 mg/cm²)的比例包被培養(yǎng)皿/板/瓶表面。充分覆蓋包被表面。2.4放置37°C培養(yǎng)箱，至少干燥2h。吸掉多余明膠溶液，用培養(yǎng)基或PBS緩沖液清洗一遍，晾干后即可使用。

注意事項

1)明膠凍干粉室溫密封保存保持數年穩(wěn)定。但在空氣中加熱到100C，會膨脹變軟，解聚產生一種碳質并伴隨吡啶堿類和氨氣的產生。 < 35-40℃明膠膨脹且吸收5~ 10倍體積的水產生凝膠。明膠溶于甘油和醋酸，在熱水比冷水溶解性強。幾乎不溶于大多數有機溶劑比如醇類、氯仿、二硫化碳、四氯化碳、酯類、苯類、酮類和油。

2)為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

本產品僅供科研使用，不可用于臨床診斷應用或其他用途。